变形链球菌耐氟菌ffh基因siRNA干扰序列的筛选鉴定
目的 筛选鉴定变形链球菌耐氟菌(UA159-FR)ffh基因的siRNA干扰序列.方法设计合成4段21 bp的核酸[1],利用电穿孔方法转入UA159-FR使其与ffh基因序列靶向位点结合.通过RT-PCR 和Real-time PCR技术验证靶向沉默ffh基因的效果,筛选出最佳siRNA干扰序列.结果倒置显微镜观察细菌电转效果正常.转染12 h内除siRNA1外其他3对siRNA都可以抑制ffh基因的表达,而在转染超过12 h达到24 h后,只有siRNA2可以更稳定的抑制ffh基因的表达.结论 siRNA干扰技术可以有效的沉默UA159-FR的ffh基因,siRNA2在沉默过程中效果较稳定.
siRNA、ffh基因、变形链球菌耐氟菌
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Q78(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金资助3A411Ⅹ463431
2014-02-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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