Sm3+标记抗心磷脂抗体IgM时间分辨荧光免疫分析法的建立
目的 建立高灵敏度、宽量程的定量检测患者血清中的抗心磷脂抗体(anticardiolipin antibody,ACA)IgG的Sm3+标记时间分辨荧光免疫分析方法.方法采用ACA抗原(心磷脂+β2 糖蛋白I)和兔抗人IgM抗体分别作为固相抗原和钐标记抗体,如果样本中存在ACA抗体,则形成ACA抗原-ACA抗体-钐标记兔抗人IgM抗体复合物,加入解离增强液解离铕离子,检测荧光强度,样本中ACA-IgM抗体含量与荧光强度成正比;对建立的时间分辨荧光免疫(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)法检测ACA抗体的线性范围、精密度、检测范围进行分析;对25例ACA-IgM抗体阳性血清标本分别利用TRFIA 及ELISA 法检测ACA-IgM抗体,分析其相关性;收集50例健康献血者,利用TRFIA检测其血清中的ACA-Ig抗体,计算临床特异度.结果利用SPSS 13.0统计软件进行统计学分析,TRFIA法检测高、中、低 3 种浓度混合血清的批内(n=20)精密度分别为2.39%、3.26% 和3.94%,批间(n=8)精密度分别为2.92%、3.73% 和4.35%;方法的灵敏度为0.1 MPL U/ml;TRFIA法检测健康献血者,临床特异度为98%;TRFIA 与ELISA 2种方法检测结果的一致性检验采用相关性分析,相关系数为0.956;将1份 ACA-IgM抗体强阳性的血清标本从2483 MPL U/L倍比稀释至0.151 MPL U/L,ELISA方法较好的线性范围在4.85-310.4 MPL U/L,而TRFIA方法在0.151-2483 MPL U/L都有较好的线性.结论 首次建立稳定的高灵敏度和宽检测范围的TRFIA法检测人血清中的ACA-IgM抗体,对早期诊断自身免疫性疾病及监测疗效具有重要意义,该方法以其优势有望在各检验科室得以普遍应用.
自身免疫性疾病、抗心磷脂抗体、时间分辨荧光免疫
18
R446.62(诊断学)
国家"十一.五"科技支撑计划课题2008BAI59B02;无锡市科技局指令性科研项目CSE01010
2014-02-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共5页
1-5
