SPACR原核表达载体的构建和表达

摘要：

目的 构建Sialoprotein associated with cones and rods (SPACR) 原核表达载体并高效表达.方法 根据基因文库中SPACR基因的cDNA序列设计引物,采用PCR方法扩增SPACR cDNA片段,并克隆进原核表达载体pGEX-6P-1中,转化于大肠杆菌BL21,测序鉴定后,用IPTG诱导表达出目的 蛋白,经谷胱甘肽琼脂糖柱柱层析纯化,收获表达产物进行SDS-PAGE电泳分析和Western blot鉴定.结果 PCR后扩增得到的目的 片段,经酶切鉴定及DNA序列测定,证实重组载体pGEX-6P-1-SPACR构建正确,表达蛋白分子量约为分别为21.2、22.6、36.2及20.8kDa.结论 在大肠杆菌中获得了SPACR片段的高效表达,为研究其蛋白功能奠定了基础.

关键词：SPACR、原核表达、融合蛋白

所属期刊栏目：15

分类号：R774(眼科学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目31071222;吉林省科技发展计划资助项目200705232,200705242

在线出版日期：2011-09-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1231-1235