晚期氧化蛋白产物模拟表位的初步研究

摘要：

目的 利用噬菌体展示肽库筛选技术获得模拟人晚期氧化蛋白产物(advanced oxidation protein products,AOPP) 表位的序列,探索该表位的分布与表达.方法 以抗晚期氧化蛋白产物多克隆抗体为靶,对噬菌体随机12肽库进行免疫亲和筛选, ELISA鉴定阳性噬菌体克隆特异性;对阳性克隆进行DNA测序并推导其氨基酸序列,利用生物信息学技术检索其分布与相似性.结果 经3轮亲和筛选获得18株与靶分子特异结合的阳性噬菌体克隆,阳性率为62.07%.竞争ELISA结果表明,AOPP可有效抑制阳性噬菌体克隆与抗体结合,其中对No.6 克隆的IC50达到0.2 ug/ml,提示其能模拟AOPP表位.经DNA测序并推导氨基酸序列,得到LXDMLXD保守序列(X为任意氨基酸);发现该序列不存在于正常人与哺乳动物的蛋白分子,但与某些真菌及寄生虫蛋白分子有同源性.结论 通过噬菌体肽库筛选技术获得模拟AOPP表位并具良好抗原性的短肽序列;证实该结构不存在于正常人与哺乳动物蛋白分子,正如AOPP并非正常组织蛋白.

关键词：噬菌体展示肽库、晚期氧化蛋白产物、表位、模拟位

所属期刊栏目：15

分类号：R392-33

资助基金：国家自然科学基金基金-广东省联合基金重点项目U0932002

在线出版日期：2011-06-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：765-768