重组HBsAg真核表达载体的构建及其稳定转染H22细胞的筛选

摘要：

目的 构建乙肝表面抗原(HBsAg)基因(678bp)的真核表达质粒(pcDNA3 -HBsAg),转染小鼠乳肝癌细胞(H22),获得其稳定表达细胞株(H22/HBsAg).方法 用PCR方法从含乙肝病毒(HBV)基因的PUC18-HBV质粒上扩增HBsAg基因序列;经酶切、连接构建pcDNA3-HBsAg;利用改良的阳离子脂质体介导法将其转染入H22细胞,经G418筛选获得阳性克隆细胞株,用RT-PCR法检测阳性细胞株的HBsAg mRNA.结果成功构建了重组HBsAg真核表达载体,并获得了稳定表达HBsAg的细胞株,为进一步的实验研究奠定了基础.

关键词：HBsAg、小鼠肝癌细胞、转染

所属期刊栏目：15

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

资助基金：吉林大学研究生创新基金资助项目20091031

在线出版日期：2011-02-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：14-16