丙肝病毒siRNA表达载体构建及抗病毒作用研究

摘要：

目的 进行丙型肝炎病毒(HCV)RNA干扰(RNA interference RNAi)作用研究.方法 本实验选择HCV NS3基因片段作为靶序列,合成含有靶序列的DNA片段并克隆到pGCsi-U6/Neo/GFP/siNeGative载体中,构建可表达具有发夹结构双链siRNA的真核表达质粒pGCsi-U6/Neo/GFP/A,并转染Hela细胞,用HCV攻击该细胞,通过TCID50和HCV负链RT-PCR检测该载体对HCV感染细胞的保护效果.结果 通过测序及荧光显微镜观察证明载体构建成功,实验组TCID50明显高于对照组,且RT-PCR结果显示pGCsi-U6/Neo/GFP/A转染组的HCV负链RNA表达量显著低于对照组.结论 证实重组质粒表达产物能成功地使模型细胞中的HCV NS3基因沉默,并间接抑制了病毒的复制,本实验的成功无疑为HCV的治疗及蛋白功能的研究打下坚实的基础.

关键词：丙型肝炎病毒、Hela细胞、RNA干涉

所属期刊栏目：13

分类号：R512.6+3(传染病)

在线出版日期：2009-07-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：723-726