2′,5′-寡腺苷酸合成酶的表达及其单克隆抗体的制备与应用

摘要：

目的 用基因工程技术表达2′,5′腺苷酸酶(2-5AS)蛋白为抗原制备单克隆抗体,供荧光素标记抗体流式细胞术检测细胞内2-5AS应用.方法 将2-5AS基因片段插入到带有His.Tag的pET-30a(+)质粒,并转化到宿主菌E.coli.BL21(DE3),ITPG诱导表达,Ni柱纯化,获得2-5AS蛋白后制备单克隆抗体.结果 插入片段酶切测序证实,插入的片段与目的 片段序列相符;Ni柱纯化过程中可见目的 蛋白的洗脱峰;经Tricine-SDS-PAGE电泳,Western Blotting鉴定,得到表达蛋白;用该蛋白制备了2-5AS单克隆抗体.结论 基因工程技术表达2-5AS获得成功,制备了单克隆抗体,为进一步应用流式细胞术检测细胞内2-5AS提供保证.

关键词：2′、5′腺苷酸酶、基因表达、单克隆抗体

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分类号：R446.6(诊断学)

资助基金：本课题受吉林省科技发展计划项目20050547;吴阶平基金会项目200355-C;教育部科学技术研究重点项目资助

在线出版日期：2009-03-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1491-1493