利用重组蛋白制备和鉴定分枝杆菌HSP65单克隆抗体

摘要：

目的制备针对牛分枝杆菌热休克蛋白65(HSP65)的单克隆抗体(mAb)并进行鉴定.方法以CpGODN1826/Alum为佐剂,不同的HSP65融合蛋白为免疫抗原和检测抗窄,用聚乙二醇(PEG)法制备杂交瘤细胞,ELISA检测杂交瘤细胞分泌抗体的效价和类型,Western blot分析抗体的特异性.结果获得5株稳定分泌抗HSP65蛋白的McAb,3株细胞分泌的mAb为IgG1亚类,2株为IgG2a.ELISA和Western blot结果显示,mAb能特异性结合HSP65-PSA-tag、HSP65-MUC1-tag和HSP65重组蛋白,但与Chaperon-PSA重组蛋白和宿主菌BL21的菌体裂解蛋白不发生结合.结论纯化的重组蛋白可代替的牛分枝杆菌,用于HSP65 mAb的制备和鉴定.获得的HSP65 mAb为HSP65及其重组蛋白的功能研究奠定基础.

关键词：牛分枝杆菌BCG、HSP65、重组蛋白、单克隆抗体、CpG/Alum

所属期刊栏目：10

分类号：R3(基础医学)

资助基金：科技部科研项目2002AA214141

在线出版日期：2006-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：225-227