葡激酶在毕赤酵母中的表达及纯化

摘要：

目的 探索葡激酶基因在毕赤酵母中的表达和纯化方法.方法 根据毕赤酵母的偏性合成了葡激酶基因,克隆到分泌型酵母表达载体pPIC9K中,重组载体线性化后,转化毕赤酵母GS115,甲醇诱导表达.应用DEAE-Sepharose FF、Q-Sepharose FF和Sephacryl S-200凝胶过滤层析法纯化表达产物,采用溶圈法对纯化产物进行生物学活性测定.结果 葡激酶在毕赤酵母中GS115的表达量约站总蛋白的45%;表达产物经DEAE-Sepharose FF、Q-Sepharose FF和SephacrylS-200纯化后纯度达到95%;测得其比活为5.2×104AU/mg.结论 利用毕赤酵母成功进行了重组葡激酶基因的表达及其表达产物的纯化.

关键词：葡激酶、毕赤酵母、表达和纯化

所属期刊栏目：3

分类号：R97;Q78

资助基金：济南市科学技术发展计划项目031033

在线出版日期：2008-10-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：35-37