树突状细胞外泌体诱导间充质干细胞向成骨细胞分化

摘要：

本研究观察人树突状细胞(dendritic cells,DC)来源的外泌体(DC-derived exosome,DCex)对人骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)成骨分化的影响.采用超速离心法从树突状细胞培养上清中获取DCex,应用电子显微镜观察DCex形态并通过流式细胞术检测和鉴定其细胞来源.取第3代MSC,设3组培养诱导体系:①对照组:α-MEM基础培养液组;②实验组:α-MEM基础培养液+DCex(10 μg/ml)组;③α-MEM基础培养液+标准诱导剂组.采用荧光实时定量PCR、琼脂糖凝胶电泳检测各组成骨分化转录因子Runx2 mRNA的表达情况,并进行碱性磷酸酶(ALP)活性检测.另外,荧光染料DiI标记DCex,应用共聚焦显微镜观察DCex进入MSC的过程.结果显示,在电子显微镜下DCex呈典型的圆形或椭圆形膜层结构,直径为40-100 nm,并表达DC细胞的标志物CD83,CD86,CD80和HLA-DR.在DCex处理MSC后6h时,可在共聚焦显微镜下观察到进入到MSC胞质内的DCex,随着作用时间延长,细胞荧光强度增加.按组培养第7天,DCex实验组Runx2表达较对照组增高,差异有统计学显著性(P ＜0.05);MSC培养第14天,DCex组ALP含量OD值与对应蛋白比为2.22 ±0.27,显著高于阴性对照组(1.20±0.21) (P＜0.01),但低于标准诱导组(3.22±0.24) (P ＜0.05).结论:DCex可以促进MSC向成骨细胞分化,其具体机制仍需进一步研究证实.

关键词：树突状细胞、外泌体、间充质干细胞、成骨分化

所属期刊栏目：22

分类号：R329.28(人体形态学)

在线出版日期：2014-08-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：600-604