确证家兔外周血中存在具有多向分化能力的间充质干细胞

摘要：

本研究确证家兔外周血中存在具有多向分化潜能的间充质干细胞(MSC).取成年新西兰大白兔,经每日皮下注射粒细胞集落刺激因子30 μg/kg动员6d后采集外周血样品,用Ficoll密度梯度离心和贴壁培养法分离纯化外周血间充质干细胞(PBMSC),镜下观察其生长形态并绘制增殖曲线；流式细胞术分析其表型特征；并分别对培养的PBMSC进行成骨、成软骨及成脂细胞诱导分化能力鉴定.结果表明:①原代培养24h后,可见较多短梭形及多角形贴壁细胞,3-4d后出现集落样生长,传代培养的PBMSC形态均一、呈长梭形漩涡状生长；②PBMSC增殖能力旺盛,培养2d后进入对数生长期,细胞倍增时间为37.4 h；③流式细胞术检测显示,培养的PBMSC高表达CD29,不表达CD14；④PBMSC经成骨诱导培养21 d后,茜素红染色显示有明显的钙结节形成；经微团无血清软骨培养体系诱导培养21d后,细胞团切片,阿利新蓝染色呈强阳性反应；经成脂诱导培养21 d后,油红染色显示诱导细胞胞浆内有大量脂滴.结论:成功从兔外周血中分离培养了PBMSC,在适宜诱导培养条件下具有向成骨、成软骨、成脂分化的能力.

关键词：外周血、间充质干细胞、诱导分化、成骨细胞、成软骨细胞、成脂细胞、兔

所属期刊栏目：21

分类号：R329.28(人体形态学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目编号81060148

在线出版日期：2013-05-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：193-197