利用mCherry荧光蛋白报告布鲁氏菌VirB启动子体外活性质粒的构建及应用

摘要：

布鲁氏菌病是由布鲁氏菌感染引起的人畜共患传染病,对养殖业的发展和人类的公共健康安全有着严重的危害.由VirB编码的Ⅳ型分泌系统(T4SS)为布鲁氏菌重要的毒力因子,布鲁氏菌侵染细胞后,吞噬体酸化被证实是VirB启动T4SS的主要信号,利用mCherry红色荧光蛋白作为报告基因,构建可以在体外酸性环境中检测VirB启动子活性的质粒,对于研究布鲁氏菌毒力基因的表达具有重要意义.以pBE-1质粒为骨架,构建质粒pBE-1-VirB-mCherry,以pBE-1-ptrc-mCherry质粒为阳性对照,通过电穿孔法转入布鲁氏菌S2株中,构建工程菌株S2(pBE-l-ptrc-mCherry)和S2(pBE-1-VirB-mCherry).体外酸性环境下诱导工程菌株S2(pBE-l-VirB-mCherry),结果显示,mCherry荧光蛋白可以精准地报告VirB启动子的活性.结果表明,构建了利用mCherry荧光蛋白报告布鲁氏菌VirB启动子活性的质粒,并验证mCherry荧光蛋白可以精准反应布鲁氏菌VirB启动子在体外的活性,为研究布鲁氏菌毒力基因,揭示其Ⅳ型分泌系统致病机制奠定基础.

关键词：mCherry荧光蛋白、布鲁氏菌、VirB启动子、Ⅳ型分泌系统

所属期刊栏目：54

分类号：S852.614(动物医学（兽医学）)

资助基金：河北省现代农业产业技术体系第三期奶牛创新团队建设项目;石家庄圣博生物科技有限公司研发基金项目

在线出版日期：2024-01-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：34-40