宿主蛋白Ambra 1介导非洲猪瘟病毒MGF360-9L抑制其复制的机制

摘要：

MGF360-9L是非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)重要的毒力基因,本实验室前期使用免疫共沉淀和液相色谱-质谱(IP-MS)联合技术,明确了 MGF360-9L和宿主蛋白自噬/苄氯素1调节因子1(autophagy/beclin-1 regulator 1,Ambra 1)具有相互作用,现有的研究已经证实宿主蛋白Ambra 1在病原感染中发挥重要作用.为明确Ambra1介导MGF360-9L对ASFV复制的调控作用及其机制,本研究构建Ambra 1真核表达质粒,使用免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation,Co-IP)和间接免疫荧光(indirect immunoflu-orescence assay,IFA)技术,验证了 Ambra 1和MGF360-9L的互作及互作区域.设计并合成Ambra 1的RNA干扰(RNAi)序列,运用实时荧光定量PCR(real-time qPCR,RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹(Western-blot)技术,证明了 Ambra 1过表达抑制ASFV的复制,下调Ambra 1的表达则能够促进ASFV的复制.此外也证明了Ambra1剂量依赖性降解MGF360-9L蛋白.总之,本研究明确了宿主蛋白Ambra 1介导ASFV MGF360-9L抑制其复制的初步机制.该研究丰富了 ASFV蛋白与宿主蛋白之间的互作调控网络,为进一步研究ASFV-宿主相互作用积累了数据.

关键词：非洲猪瘟病毒、MGF360-9L、Ambra1、蛋白互作

所属期刊栏目：53

分类号：S852.659.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划;国家重点研发计划;甘肃省科技重大专项;甘肃省科技重大专项;甘肃省科技重大专项;甘肃省科技重大专项;中国农业科学院重大任务;国家生猪产业技术体系项目;广东省农业科技创新十大主攻方向揭榜挂帅项目

在线出版日期：2023-05-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：403-411