非洲猪瘟病毒pp62蛋白单克隆抗体的制备和鉴定

摘要：

pp62蛋白是非洲猪瘟病毒(ASFV)CP530R基因编码的多聚蛋白前体,可被蛋白水解酶切割形成成熟蛋白p35、p15和p8,与pp220多聚蛋白前体的加工产物组装成病毒核壳.本研究参考ASFV China/2018/AnhuiXCGQ毒株基因序列,分析后选取CP530R基因N端(1-612 bp)及C端(784-1593 bp),分别构建原核表达质粒pET-28a-pp62-N和pET-28a-pp62-C;转化Rosetta感受态细胞,IPTG诱导表达pp62蛋白;再用纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,经细胞融合和阳性克隆筛选后,获得4株可稳定分泌pp62单克隆抗体的杂交瘤细胞.Western-blot检测ASFV感染PAM细胞中pp62剪切体的结果显示,1株仅识别pp62蛋白,1株仅识别p35蛋白,1株仅识别p15蛋白,1株可识别pp62和p8蛋白.IFA鉴定结果显示,4株均能与ASFV感染PAM细胞产生特异性绿色荧光.本研究为建立ASFV诊断方法和研究pp62的生物学功能奠定了生物材料基础.

关键词：非洲猪瘟病毒、pp62蛋白、单克隆抗体

所属期刊栏目：52

分类号：S852.659.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划;国家自然科学基金;江苏省重点研发计划现代农业项目

在线出版日期：2022-06-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：579-585