牛呼吸道合胞体病毒通用型实时荧光RT-PCR检测方法的建立与应用

摘要：

为了建立牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)通用型实时荧光RT-PCR快速检测方法,本研究根据Gen-Bank 登录的各型BRSVN基因序列共有保守区域设计引物,首先建立了检测BRSV的常规RT-PCR方法.结果显示,该常规RT-PCR检测方法特异性良好,仅检测靶标病毒呈阳性,检测限为1.71×103 copies/μL.在此基础上,基于SYBR Green Ⅰ染料建立了检测BRSV的实时荧光RT-PCR方法,该方法特异性良好,检测限为1.71×101copies/μL,其检测灵敏度显著高于常规RT-PCR方法.利用建立的常规RT-PCR方法和实时荧光RT-PCR方法对采集的46份牛鼻拭子样本和22份牛肺脏样本进行平行检测.结果显示,常规RT-PCR方法从牛鼻拭子和肺脏样本中分别检出10份和4份呈阳性,实时荧光RT-PCR方法分别检出13份和6份呈阳性,实时荧光RT-PCR方法的阳性检测率高于常规RT-PCR方法.本研究建立的BRSV通用型实时荧光RT-PCR方法为BRSV的临床检测和流行病学调查提供技术支持.

关键词：牛呼吸道合胞体病毒、N基因、通用型real-time RT-PCR、样本检测

所属期刊栏目：52

分类号：S852.659.5(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划2016YFD0500904

在线出版日期：2022-06-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：554-563