非洲马瘟病毒VP7蛋白在昆虫细胞中的表达及其抗体制备

摘要：

为了表达非洲马瘟病毒(AHSV)VP7蛋白并制备其多克隆抗体,参考GenBank中已公开的AHSV基因序列,人工合成编码AHSV-1 VP7蛋白的S7基因全长序列,利用PCR技术扩增得到S7基因片段,将其克隆到pFastBac? HTb载体上,构建重组载体pFastBac?-AHSVS7,通过蓝白斑试验筛选出重组杆粒Bacmid-AHSVS7,并转染昆虫细胞,拯救获得重组杆状病毒.SDS-PAGE和Western-blot结果显示,AHSV-1 VP7重组蛋白在昆虫细胞中获得表达.利用组氨酸标签纯化树脂获得了高纯度的VP7蛋白,将其免疫新西兰大白兔制备相应的多克隆抗体,该抗体不仅能与杆状病毒重组表达的AHSV-1 VP7蛋白反应,且能识别BHK21细胞中表达的AHSV-1 VP7蛋白,具有很好的特异性.本试验成功利用杆状病毒系统表达了 AHSV-1 VP7重组蛋白,并制备了多克隆抗体,这为后续AHSVVP7蛋白功能的研究以及ELISA诊断方法的建立奠定了基础.

关键词：非洲马瘟病毒、VP7蛋白、昆虫细胞表达、多克隆抗体

所属期刊栏目：52

分类号：S852.659.4(动物医学（兽医学）)

资助基金：中国农业科学院创新工程项目;中央级公益性科研院所基本科研业务费专项

在线出版日期：2022-04-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：317-323