猪圆环病毒2型可视化RPA快速检测方法的建立

摘要：

本研究针对猪圆环病毒2型(porcinecircovirus2,PCV2)的cap基因保守序列,设计特异性RPA引物和nfo探针,建立了 一种快速检测PCV2的基于侧流层析试纸条的可视化RPA方法(lateral flow strip RPA,LFS-RPA).结果,建立的LFS-RPA方法最佳反应条件是39℃恒温扩增20 min,可在5 min内实现对检测结果的肉眼可视化判定;该方法特异性强,仅对PCV2出现阳性扩增,对本研究涉及的其他猪重要病原均无交叉反应;以含PCV2全长序列的重组质粒为模板,LFS-RPA的检出限为10 copies/μL.进一步应用建立的LFS RPA方法对30份猪临床样品进行PCV2检测,并与real-time PCR方法进行比较,结果显示两种方法的检测一致性达86.7％(26/30),其中4份Ct值在36～38之间的临床样品利用LFS-RPA方法检测为阴性.上述结果表明,本研究建立的LFS-RPA方法操作简单,对仪器设备要求低,可以快速且直观的实现对检测结果的判断,可以满足现场检测的要求,对养猪场一线PCV2快速诊断和防控具有重要现实意义.

关键词：猪圆环病毒2型、cap基因、LFS-RPA、可视化、快速检测

所属期刊栏目：52

分类号：S852.651(动物医学（兽医学）)

资助基金：河北省重点研发计划项目19226612D

在线出版日期：2022-04-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：304-309