10.16656/j.issn.1673-4696.2022.0040
BTV和PPRV双重荧光定量RT-PCR检测方法的建立
为建立一种能够同时检测蓝舌病病毒(BTV)和小反刍兽疫病毒(PPRV)的快速检测方法,本研究选取蓝舌病病毒的NS3基因和小反刍兽疫病毒的N基因作为靶基因,参照GenBank上公布的两种基因序列,通过序列比对后选取一段保守性较高的区域,利用Beacon designer 8设计引物和探针并优化反应体系及反应条件,建立了双重荧光定量RT-PCR检测方法.结果显示,该方法检测BTV和PPRV阳性质粒标准品的最低检出量分别为1.7 copies/μL和1.2 copeis/μL;与山羊痘病毒、羊口疮病毒、口蹄疫病毒、羊腐败性梭菌、布氏杆菌及弓形虫无交叉反应,具有良好的特异性;其组间重复性和组内重复性的变异系数均小于2%,表明该方法具有较好的重复性.结果表明,建立的双重荧光定量RT-PCR检测方法适用于BTV和PPRV的快速检测.
蓝舌病病毒、小反刍兽疫病毒、双重荧光定量RT-PCR
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S852.659.4(动物医学(兽医学))
国家重点研发计划2017YFD0502306
2022-04-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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285-291