猪丁型冠状病毒可视化LAMP检测方法的建立与应用

摘要：

为建立一种简单、快捷,适用于基层检测猪丁型冠状病毒(PDCoV)的方法,根据GenBank上登录的PDCoV N基因的保守序列设计了1组环介导等温扩增(LAMP)引物,以重组质粒pMD19-T-N为模板、羟基萘酚蓝为显色剂,优化反应条件及体系,并检测该方法的特异性及灵敏度.结果 显示,该方法与猪流行性腹泻病毒、猪博卡病毒、猪传染性胃肠炎病毒、伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型均无交叉反应,且最低检测量为5.1×101 copies/μL.进一步对本实验室2016年至2019年在河北保定收集的95份临床样品进行检测,LAMP检测结果与普通RT-PCR检测结果的符合度高,检测时间为1h.结果 表明,本研究中建立的LAMP检测方法简便、特异、灵敏、快速,有望在PDCoV的临床检测中发挥重要作用.

关键词：猪丁型冠状病毒、环介导等温扩增、可视化、羟基萘酚蓝、检测

所属期刊栏目：52

分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：河北省重点研发计划项目;河北省农业产业技术体系生猪创新团队项目

在线出版日期：2022-03-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：19-24