10.16656/j.issn.1673-4696.2020.0193
维氏气单胞菌脂蛋白Lpp基因缺失株的构建及其部分生物学特性分析
为了探究维氏气单胞菌毒力因子脂蛋白的致病机制,在全基因测序的基础上,通过同源重组缺失脂蛋白基因.首先扩增脂蛋白基因的上下游同源臂,通过重叠PCR连接后,凝胶回收DNA片段;连接克隆载体pMD18-T,转化DH5α感受态细胞,测序成功后提取质粒进行双酶切,连入相同酶切的Pre112自杀性质粒;依次转化DH5α-λpir、WM3064感受态细胞,作为供体菌;和受体菌野生株进行同源重组,并筛选鉴定.结果 显示,成功缺失了维氏气单胞菌脂蛋白基因.生物学特性分析结果发现,缺失株和野生株的生长速度相似,生物膜形成能力降低,鞭毛缺失,游动能力减弱,细菌的毒力降低,溶血活性没有明显变化.因此,成功构建了维氏气单胞菌脂蛋白基因缺失株,并分析了其部分生物学特性,为进一步研究脂蛋白基因的功能奠定了一定的基础.
维氏气单胞菌、脂蛋白基因、基因缺失、生物学特性
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S852.615(动物医学(兽医学))
国家自然科学基金31672686
2020-12-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共8页
1413-1420