猪繁殖与呼吸综合征病毒BJ3毒株N蛋白的原核表达及其单克隆抗体的制备

摘要：

为表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)BJ3毒株N蛋白及制备抗N蛋白单克隆抗体,将N基因克隆至原核表达载体pColdⅠ,利用大肠杆菌BL21表达出了N蛋白.将IPTG诱导的细菌反复冻融3次后超声裂解,离心后分别收集上清和沉淀,用镍柱亲和层析分别纯化,SDS-PAGE结果显示,N蛋白主要以包涵体的形式存在.用纯化的N蛋白免疫小鼠,取免疫小鼠脾细胞和SP2/0骨髓瘤细胞融合,间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞,3次亚克隆后获取1株PRRSV N单抗,命名为F4.F4可与大肠杆菌BL21、不同PRRSV分离株表达的N蛋白发生特异性反应.本试验为进一步研究N蛋白的结构、功能及建立快速诊断PRRSV方法奠定了基础.

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒、原核表达、N蛋白、单克隆抗体

所属期刊栏目：50

分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;贵州省科学技术基金项目;贵州大学博士基金;贵州省高层次创新型人才培养项目;贵州省研究生工作站项目

在线出版日期：2020-10-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1119-1126