NF-κB受体激活因子配体的表达及其多克隆抗体的制备

摘要：

为获取猪源NF-κB受体激活因子配体(RANKL)及其抗体,根据GenBank中猪源RANKL的序列设计引物,将合成的RANKL基因克隆至pMAL-C4x表达载体,转化到大肠杆菌DH5α.经PCR和双酶切鉴定后测序分析,将阳性克隆转化至大肠杆菌BL21后通过IPTG诱导表达.优化表达条件,确定是包涵体表达,蛋白大小为78.1 ku.使用纯化的RANKL为抗原免疫兔制备多克隆抗体.构建重组质粒pCMV-RANKL,表达目的蛋白并使其与多克隆血清反应.经ELISA、Western-blot和IFA鉴定,证实抗RANKL多克隆抗体有良好的抗原特异性,为后续黏膜免疫的研究奠定了基础.

关键词：猪RANKL、原核表达、多克隆抗体

所属期刊栏目：50

分类号：S852(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;国家重点研发计划

在线出版日期：2020-05-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：473-478