痘苗病毒SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立与应用

摘要：

为实现痘苗病毒的快速检测,根据痘苗病毒TA27L基因设计引物,经各项条件优化后,建立痘苗病毒SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法,同时将PCR扩增的TA27L基因克隆至pMD18-T载体,将测序正确的重组质粒作为标准品进行敏感性、特异性和重复性试验.结果 显示,所建立方法的Ct值与标准品在7.58×109～7.58×102 copies/μL范围内呈良好线性关系,R2为0.997,斜率为-3.175,检测下限为75.8copies且具有良好的特异性.临床样本检测结果表明该方法较普通PCR方法的检出率更高.结果 表明,建立的痘苗病毒SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法为痘苗病毒及其相关基因重组毒株的生物学特性研究提供了必要的技术手段.

关键词：痘苗病毒、SYBR Green Ⅰ、荧光定量PCR

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分类号：S852.659.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：广西自然科学基金;浙江省青年基金;温州市基础性科研项目;温州市基础性科研项目

在线出版日期：2020-05-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：430-436