霍乱弧菌三重荧光定量PCR检测方法的建立与应用

摘要：

为建立一种基于TaqMan探针法定量检测霍乱弧菌的三重荧光定量PCR方法,以霍乱弧菌种特异性基因ompW和毒力基因ctx、hly为靶基因,分别设计特异性引物及相应的TaqMan探针.在ompW、ctx、hly探针的5”端分别标记CY5、FAM、HEX荧光报告基团,3”端均标记BHQ1荧光淬灭基团.结果 显示,本试验建立的三重荧光定量PCR方法与其他菌株无交叉反应,其最低检出限达到了10 CFU/mL,重复性试验中每组变异系数均小于1.4％;检测人工染菌的虾肉和贝类样品时,最低检出限也达到1×102 CFU/mL.结果 表明,本实验室建立的三重荧光PCR检测方法具有灵敏度高、特异性强和重复性好的特点,是高通量检测致病性霍乱弧菌的有效手段.

关键词：霍乱弧菌、ctx、hly、ompW、三重荧光定量PCR

所属期刊栏目：49

分类号：S852.613(动物医学（兽医学）)

资助基金：上海市科学技术委员会科研计划项目17140900400;国家重点研发计划项目2017YFC1200201

在线出版日期：2019-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1143-1151