基于昆虫细胞表达的鹅细小病毒VP3蛋白的VP3-ELISA诊断方法的建立

摘要：

将鹅细小病毒EP22株VP3基因克隆到杆状病毒转移载体pFast-Bac-HTB中,酶切鉴定及测序筛选出阳性重组转座载体pFastBac-VP3,转化至含有杆状病毒穿梭载体Bacmid的DH10Bac感受态细胞,构建杆状病毒表达载体,获得重组转座子rBacmid-VP3,在脂质体介导下转染Sf9昆虫细胞,获得到含鹅细小病毒VP3基因的重组杆状病毒rBV-VP3.经SDS-PAGE、Western-blot以及免疫组化试验证实,VP3基因在Sf9细胞中成功表达.利用表达的VP3蛋白建立VP3-ELISA血清学检测方法并对130份鹅血清样品进行检测,以中和试验作为金标准进行对比试验.结果 显示,VP3-ELISA检测方法的特异性为100％,敏感性为96.2％,并且VP3-ELISA与其他鹅病阳性血清间不出现交叉反应性.上述研究结果表明,本研究建立的VP3-ELISA是一种特异的、灵敏的血清学诊断方法.

关键词：鹅细小病毒、VP3基因、杆状病毒表达、VP3-ELISA

所属期刊栏目：49

分类号：S852.659.2(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;国家重点研发计划;武汉船舶职业技术学院院协同创新项目

在线出版日期：2019-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1112-1118