猪细胞因子信号传导抑制因子1蛋白的表达纯化与多克隆抗体制备

摘要：

为制备猪细胞因子信号传导抑制因子1(SOCSl)的多克隆抗体,采用RT-PCR扩增猪SOCS1基因序列,将其克隆至原核表达载体pET-28a(+),构建重组表达载体pET28a-pSOCS1,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,在不同温度、IPTG浓度、诱导时间等条件下进行表达,确定最佳表达条件,并对重组蛋白pSOCS1进行纯化.以表达的重组蛋白pSOCS1免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,经4次免疫,间接ELISA测得抗体效价达到l∶51 200.Western-blot和间接免疫荧光试验结果表明,该多克隆抗体可与pSOCS1重组蛋白和经HEK293T细胞过表达的pSOCS1蛋白发生特异性反应,证明pSOCS1重组蛋白免疫原性良好.本研究为后续制备单克隆抗体、研究猪SOCS1相关作用机制奠定了基础.

关键词：猪SOCS1、生物信息学分析、原核表达、多克隆抗体

所属期刊栏目：49

分类号：S852(动物医学（兽医学）)

资助基金：河南省农业科学院自主创新专项基金;优秀青年科学基金;河南省现代农业生猪产业体系项目

在线出版日期：2019-07-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：707-714