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10.16656/j.issn.1673-4696.2018.0084

口疮病毒112基因的原核表达及生物信息学分析

引用
为了确证口疮病毒112基因的免疫学特性,本研究参考GenBank载录的口疮病毒NZ2株112基因序列设计1对特异性引物,通过PCR扩增口疮病毒112全基因,连接到原核表达载体pET-28a(+)中,将测序正确的重组质粒命名为pET-28a(+)-ORFV 112,并转化到Rosetta(DE3)感受态细胞中,用IPTG进行诱导重组ORFV 112蛋白表达,并分别进行SDS-PAGE和Western-blot分析鉴定,并运用生物信息学软件对口疮病毒112蛋白的性质和结构进行预测分析.结果表明,ORFV 112基因的大小约为861 bp;通过重组表达的融合蛋白大小约为40 ku;SDS-PAGE和Western-blot分析表明,该蛋白具有免疫反应原性 预测分析表明,ORFV 112蛋白分子式为C1357H2155N367O451S11,理论等电点(PI)为4.68,消光系数为23 295,脂肪指数为81.78,总平均疏水性(GRAVY)为-0.383,其二级结构主要以α-螺旋(29.37%)和无规则卷曲(40.56%)构成.本研究为深入研究口疮病毒112蛋白结构与功能及该蛋白与宿主细胞的相互作用奠定了基础.

口疮病毒、ORFV 112基因、原核表达、生物信息学分析

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S852.659.1(动物医学(兽医学))

国家现代肉羊产业技术体系资助项目CARS-39-04B;内蒙古科技专项“巴美肉羊产业化技术研究与集成应用”资助项目

2018-09-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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中国兽医科学

1673-4696

62-1192/S

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2018,48(7)

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