山羊地方性鼻内肿瘤病毒SU蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

摘要：

为获得纯化的山羊地方性鼻内肿瘤病毒(enzootic nasal tumor virus of goats,ENTV)表面蛋白(surface protein,SU protein)和抗SU蛋白的多克隆抗体,根据GenBank已登录的ENTV Shaanxi株SU基因序列,设计合成1对特异性引物,PCR扩增SU基因并将其连接于原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组质粒pET-28a-SU,经鉴定正确后转化大肠杆菌Rosetta(DE3)株进行诱导表达,并进行SDS-PAGE分析.重组菌经IPTG诱导后成功表达出分子质量为43 ku的重组蛋白.将诱导表达的蛋白经镍柱亲和层析纯化、复性后免疫小鼠制备多克隆抗体.Western-blot分析结果表明,原核表达纯化的SU蛋白能够与制得的小鼠抗SU蛋白多克隆抗体特异性结合.上述结果表明,本试验成功获得了纯化的ENTV SU蛋白和小鼠抗ENTV SU蛋白的多克隆抗体,为进一步研究SU蛋白在ENTV感染过程中的作用和建立诊断方法提供了材料.

关键词：山羊地方性鼻内肿瘤病毒、SU蛋白、原核表达、纯化、多克隆抗体

所属期刊栏目：46

分类号：S855.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：陕西省农业科技创新与攻关项目2016NY-092;陕西省重点产业创新链项目2016KTZDNY02-06;西北农林科技大学大学生创新创业训练计划项目201610712019

在线出版日期：2017-02-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1563-1567