靶向TLR2基因的siRNA对牛疱疹病毒Ⅰ型增殖规律的影响

摘要：

为研究牛胚胎气管(EBTr)细胞Toll样受体2(TLR2)在牛疱疹病毒Ⅰ型(BHV-1)感染的天然免疫反应中的作用,本研究利用小分子干扰RNA (siRNA)技术,以TLR2为靶向设计并合成了3条siRNA干扰序列,用SYBR Green Ⅰ定量PCR方法筛选出最佳的siRNA-TLR2干扰片段,继而转染EBTr细胞使其TLR2沉默后感染BHV-1,用TaqMan定量PCR方法检测BHV-1不同时间点的增殖变化.结果显示,与对照组相比转染后第48小时siTLR2A、siTLR2B和siTLR2C在EBTr细胞中分别对TLR2 mRNA表达量下调了35.05％、69.20％和84.85％,筛选出的siTLR2C片段在第12～72小时可以显著抑制TLR2 mRNA的表达(P＜0.05),用该片段转染EBTr细胞再感染BHV-1后第6～72小时,siRNA-TLR2组BHV-1 DNA拷贝数显著低于对照组BHV-1 DNA拷贝数(P＜0.05).本试验成功筛选出了特异性抑制EBTr细胞TLR2基因的siRNA片段,并证明抑制TLR2的表达可降低BHV-1的增殖能力.

关键词：牛疱疹病毒Ⅰ型、siRNA、EBTr细胞、TLR2、定量PCR

所属期刊栏目：46

分类号：S852.659.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金31260597

在线出版日期：2017-02-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1524-1530