10.16656/j.issn.1673-4696.2016.04.006
山羊副流感病毒3型HN蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
为制备山羊副流感病毒3型(caprine parainfluenza virus type 3,CPIV3) HN蛋白单克隆抗体,将CPIV3 HN基因1081~1725 bp片段(编码361~574 aa)克隆入原核表达载体pET-32a(+),构建重组表达质粒pET-32a(+)-HN361-574 aa,转化至大肠杆菌Rosetta (BL21)感受态细胞并进行诱导表达,分别用SDS-PAGE和Western-blot鉴定重组表达蛋白.结果表明,CPIV3 HN蛋白361~574 aa片段被正确表达.用两段截短的HN蛋白混合免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾与骨髓瘤细胞SP2/0融合制备单克隆抗体,分别用间接ELISA、Western-blot和IFA筛选和鉴定融合细胞上清.通过筛选获得3株杂交瘤细胞,分别命名为3F1、4A7、4H4,进一步研究表明,这3种单克隆抗体至少识别2个不同的抗原表位.本研究为CPIV3病原学检测方法的建立以及病理学诊断奠定了重要的基础.
山羊副流感病毒3型、HN蛋白、单克隆抗体、鉴定、IFA
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S852.659.5(动物医学(兽医学))
江苏省农业科技自主创新项目CX142090
2016-05-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
436-441