肠出血性大肠杆菌O157∶H7 LAMP-LFD快速检测方法的建立及初步应用

摘要：

针对肠出血性大肠杆菌O157∶H7(EHEC O157∶H7)的rfbE基因保守序列设计特异引物,通过优化反应体系、反应温度和反应时间等参数,建立了一种快速、简便的肠出血性大肠杆菌O157∶H7的环介导等温扩增-横向流动试纸条(LAMP-LFD)检测方法.特异性试验结果显示,该方法与大肠杆菌O8∶K88和O141∶K99、无乳链球菌、停乳链球菌、金黄色葡萄球菌、痢疾志贺菌、产单核细胞李氏杆菌、表皮葡萄球菌、肠炎沙门菌、猪链球菌2型、副猪嗜血杆菌、胸膜肺炎放线杆菌等12种细菌均无交叉反应.灵敏度试验结果表明,该方法对纯培养的EHEC O157∶H7的检测下限为13 CFU/mL,污染食品中EHECO157∶H7的检测下限为18 CFU/mL.研究结果表明,该方法特异性好,灵敏度高,操作简便,可肉眼直接判定结果,1h内完成检测,在食品卫生检验和临床疾病诊断方面具有良好的应用前景.

关键词：肠出血性大肠杆菌O157∶H7、环介导等温扩增-横向流动试纸条技术、rfbE基因

所属期刊栏目：45

分类号：S852.612(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863项目2012AA10160501

在线出版日期：2015-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：807-812