高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒反向遗传操作系统的构建

摘要：

采用分子生物学方法改造pBluescriptⅡSK(+)载体的多克隆位点,并使其获得CMV启动子序列;在获得该病毒的全长cDNA克隆的基础上,采用酶切、连接、转化等方法将该病毒的全长cDNA置于CMV真核启动子序列的下游,获得含有CMV启动子和HP-PRRSV XX-2012株全长cDNA克隆的重组质粒pSK-CMV-XX-2012;最后,将重组质粒直接转染Marc-145宿主细胞,拯救出HP-PRRSV XX-2012株.结果显示,含有病毒全长cDNA克隆的重组质粒直接转染Marc-145后,获得拯救病毒.病毒生长特性试验结果显示,拯救病毒与亲本病毒在Marc-145细胞上具有相似的增殖特性,且拯救病毒序列含有不同于亲本病毒的分子标记(突变产生的MluⅠ酶切位点).本研究建立了一种研究HP-PRRSV反向遗传操作系统的简单、快速、节约时间和成本的方法.

关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒、CMV启动子、反向遗传学

所属期刊栏目：45

分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;河南省教育厅科学技术研究重点项目指导计划

在线出版日期：2015-09-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：794-801