鸡β防御素2在毕赤酵母中的组成型表达及其发酵条件的优化

摘要：

合成鸡β防御素2 (AvBD2)成熟肽基因,构建重组质粒pGHK-AvBD2;将其电转化至毕赤酵母GS115;Tricine-SDS-PAGE和Western-blot检测表达产物,琼脂扩散法测定产物的抑菌活性,并测定产物的溶血活性;响应面法优化接种量、装液量和发酵温度.Tricine-SDS-PAGE和Western blot检测结果显示,在5.8ku位置出现目的蛋白质条带;抑菌活性检测表明,表达产物对粪肠球菌(ATCC29212)、大肠杆菌(CMCC44102)、金黄色葡萄球菌(ATCC25923)和巴氏杆菌具有明显的抑菌活性;发酵产物在500 mg/L时的溶血活性仅2.17％.由建立的响应面模型得到重组酵母最佳发酵条件为:接种量528 mg/100 mL、装液量8.43％、发酵温度27.8℃,产物蛋白浓度较优化前提高20％.本研究实现了AvBD2在毕赤酵母中的组成型表达,表达产物有较好的抗菌活性,为AvBD2作为新型饲料添加剂的应用奠定了基础.

关键词：鸡β-防御素2、巴斯德毕赤酵母、组成型表达、响应面法优化

所属期刊栏目：45

分类号：S852.42(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;国家高技术研究发展计划（863计划）

在线出版日期：2015-08-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：693-699