猪流行性腹泻病毒M蛋白亲和肽的筛选及其抗病毒作用

摘要：

把成功构建的猪流行性腹泻病毒(PEDV)M蛋白的阳性重组质粒pET-32a(+)-M在大肠杆菌表达系统中进行诱导表达.以表达纯化的M蛋白作为靶蛋白,利用噬菌体展示技术对随机十二肽库进行筛选,4轮淘选后,挑选出了10个与PEDV及M蛋白特异性结合力高的噬菌体单克隆,序列测定后推导的氨基酸序列分别为AGWYCTEVLCV、AYCTRHVCYLDN,多肽被命名为M2、M9.就合成多肽体外抗病毒的效果而言,间接免疫荧光试验和实时荧光定量PCR试验证明,多肽M2、M9及多肽M2与M9联合使用均能够有效抑制病毒复制,且都呈剂量依赖性.其中多肽M2抑制病毒的作用比多肽M9的高,两种多肽联合抗病毒的作用最好.上述结果为进一步研究PEDV M蛋白功能性配体和研制防治PEDV的小分子治疗制剂提供了试验依据,奠定了理论基础.

关键词：噬菌体展示、猪流行性腹泻病毒、M蛋白、多肽、抗病毒作用

所属期刊栏目：45

分类号：S852.651(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;高等学校博士学科点专项科研基金;哈尔滨市优秀学科带头人项目

在线出版日期：2015-08-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：674-679