猪传染性胃肠炎病毒RT-LAMP检测方法的建立及应用

摘要：

根据猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)N基因序列设计2对反转录环介导等温扩增(RT-LAMP)引物,建立针对TGEV N基因的RT-LAMP快速检测方法,并对该检测方法的特异性与灵敏性进行了评价.该方法在63℃恒温下作用50 min,使TGEV N基因获得了高效率特异性扩增,与猪流行性腹泻病毒等其他猪易感病毒无交叉反应,具有很好的特异性;同时该方法具有极高的灵敏性,可检测到131.4 fg/μL的目标病毒DNA,比普通PCR的灵敏度高3个数量级.反应结束后加入SYBR Green Ⅰ在紫外灯下观察颜色变化,结果显示阳性扩增产物呈现绿色荧光.经47份临床样品RT-LAMP检测结果与已得到验证的RT-PCR和ELISA结果进行比对,结果显示符合率为100％.

关键词：猪传染性胃肠炎病毒、RT-LAMP、RT-PCR、ELISA

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分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;高等学校博士学科点专项科研基金;哈尔滨市科技局优秀学科带头人研究专项

在线出版日期：2015-07-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：572-577