传染性法氏囊病病毒vp3基因在昆虫细胞中的表达及其ELISA抗原反应性的分析

摘要：

为分析传染性法氏囊病病毒(IBDV)重组VP3蛋白的ELISA抗原反应性,将IBDV vp3基因插入杆状病毒表达系统供体质粒pFastBacHTA中,构建重组供体质粒pFastBacHTA-vp3并转化大肠杆菌DH10Bac感受态细菌,经抗性筛选获得重组杆状病毒表达质粒pBac-vp3.用pBac-vp3转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒vBac-vp3.对重组杆状病毒感染的Sf9细胞用Western-blot检测,在33 ku处存在一条特异的蛋白条带;用间接免疫荧光试验检测时可见特异性荧光.以纯化的重组VP3蛋白为包被抗原建立了检测IBDV抗体的间接ELISA(VP3-ELISA),并与重组VP2蛋白包被抗原建立的VP2-ELISA和全病毒抗原ELISA(IDEXX-ELISA)进行了比较.对42份不同鸡血清中IBDV抗体的检测结果显示,VP3-EIISA的区分度低于VP2-ELISA和IDEXX-ELISA;VP3-ELISA阳性检出率低于VP2-ELISA和IDEXX-ELISA;VP3-ELISA与IDEXX-ELISA的相关系数低于VP2-ELISA与IDEXX-ELISA的相关系数.结果表明,在昆虫细胞中表达的重组VP3蛋白具有良好的特异性和抗原反应性,用它建立的ELISA的抗原反应性弱于用重组VP2蛋白和IBDV全病毒抗原建立的ELISA的抗原反应性.

关键词：传染性法氏囊病病毒、VP3蛋白、杆状病毒、ELISA

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分类号：S852.659.4(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;江苏省自然科学基金;江苏省自然科学基金;江苏省农业科技自主创新项目

在线出版日期：2015-05-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：227-234