猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白Nsp4和Nsp12多克隆抗体的制备与鉴定

摘要：

为了制备猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)两种非结构蛋白Nsp4和Nsp12的多克隆抗体,将Nsp4基因和Nsp12基因分别克隆至pET-32a(+)和pGEX-6P-1,并转化至BL21(DE3),用IPTG诱导表达,经过Ni-NTA镍离子亲和层析和包涵体洗液纯化,获得纯化的重组蛋白,然后用它们分别免疫BALB/c小鼠制备抗血清.SDS-PAGE和Western-blot鉴定结果显示,Nsp4和Nsp12分别以可溶性蛋白和包涵体形式表达,大小分别为42 ku和44 ku,均具有良好的反应原性.Western-blot和IFA结果显示,制备的抗血清均与PRRSV发生特异性反应,ELISA抗体效价均可达1:32 000.本研究结果为PRRSV Nsp4和Nsp12的生物学功能研究奠定了基础.

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒、Nsp4、Nsp12、多克隆抗体

所属期刊栏目：44

分类号：S852.659.6(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2014-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：636-640