Class Ⅰ新城疫病毒Duck/JS/10弱毒株NP重组蛋白的表达及广谱性NDV单克隆抗体的制备

摘要：

为了制备针对ClassⅠ新城疫病毒Duck/JS/10弱毒株NP蛋白的单克隆抗体,采用RT-PCR方法从Class Ⅰ新城疫病毒Duck/JS/10弱毒株中扩增出NP基因,并定向克隆至pET-32a-c(+)原核表达载体中,经酶切鉴定及测序验证后转化BL21 (DE3)进行原核表达,用纯化得到的NP重组蛋白免疫6周龄BALB/c小鼠.结果显示,成功表达出分子质量约为71 ku的NP重组融合蛋白,SDS-PAGE结果显示,表达的蛋白以可溶性形式存在于菌体中.用间接ELISA方法成功筛选出2株针对Class Ⅰ新城疫病毒Duck/JS/10弱毒株NP蛋白的单克隆抗体,该抗体具有良好的ELISA、IFA以及Western-blot效价.免疫特异性鉴定结果表明,获得的2株单克隆抗体具有良好的通用性,无论是Class Ⅰ毒株还是两种不同基因组长度的ClassⅡ毒株,均能与其发生特异反应.

关键词：新城疫病毒、Class Ⅰ、单克隆抗体、NP蛋白

所属期刊栏目：44

分类号：S852.659.5(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2014-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：611-616