小反刍兽疫病毒抗体间接ELISA检测方法的建立

摘要：

为建立一种能快速、特异、敏感地检测血清中小反刍兽疫病毒(PPRV)抗体的方法,通过RT-PCR方法扩增出1 830 bp的小反刍兽疫病毒的H基因,并将其克隆至原核表达载体pET-22b(+)中,进行H基因的重组表达.采用SDS-PAGE和Western-blot对重组蛋白进行鉴定及抗原性分析.用纯化的重组蛋白作为包被抗原,建立间接ELISA检测方法.通过矩阵法优化抗原最佳包被浓度、血清稀释度、最佳封闭剂、酶标二抗的最佳稀释度及孵育时间.结果显示,重组H蛋白(分子质量为68 ku)能与PPRV阳性血清发生特异性反应.用建立的间接ELISA与标准竞争ELISA试剂盒检测92份临床样品并进行比较,两者的符合率为94.11％.结果表明,本研究建立的间接ELISA可以用于临床PPRV抗体的检测.

关键词：小反刍兽疫病毒、H蛋白、间接酶联免疫吸附试验

所属期刊栏目：44

分类号：S852.659.5(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2014-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：569-575