H9N2亚型禽流感病毒HA-DCpep融合基因重组乳杆菌的构建及免疫原性分析

摘要：

为了构建HA-DCpep融合基因重组乳杆菌并检测其表达产物的免疫原性,以pSIP409 HA质粒为模板,采用PCR方法将HA基因和DCpep基因融合.将目的基因克隆至pGEM-T载体中,进行测序.再将阳性基因亚克隆至大肠杆菌-乳杆菌穿梭表达载体pSIP409中,电转化入植物乳杆菌NC8中,经SppIP诱导后对表达产物进行Western-blot分析.结果显示,重组菌NC8-pSIP409-HA-DCpep的裂解物中出现大小约为64 ku的反应条带,大小与预期结果相符,表明重组融合蛋白具有良好的反应原性.重组菌NC8-pSIP409-HA-DCpep口服免疫SPF雏鸡后,在免疫后第14天可被检出特异性HI抗体,28d后达到高峰.结果表明,应用重组菌NC8-pSIP409-HA-DCpep免疫雏鸡能刺激机体产生特异性体液免疫应答反应,这为研制预防禽流感的重组乳杆菌口服制剂奠定了基础.

关键词：禽流感病毒、HA-DCpep基因、乳杆菌表达载体、免疫原性

所属期刊栏目：44

分类号：S852.659.5(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863项目2013AA102806,2011AA10A215;国家自然科学基金项目31272541,31272552,81170358;教育部新世纪优秀人才支持计划项目NCET-10-0175;吉林省科技发展计划项目20111816,20080104;吉林省世行贷款农产品质量安全项目2011-Y07

在线出版日期：2014-03-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：187-192