非洲马瘟病毒TaqMan探针荧光定量RT-PCR检测方法的建立

摘要：

为建立非洲马瘟病毒(AHSV) TaqMan探针荧光定量RT-PCR检测方法,根据GenBank及自己所测的AHSV 9个血清型VP7的ORF全长核苷酸序列,设计2套位于AHSV基因组S7片段的特异引物及相应TaqMan探针.经试验,结果证实2套引物探针可将9种血清型的AHSV RNA分为2群而分别进行特异性检测,而对与AHSV同属的蓝舌病病毒、鹿出血热病毒及正常马淋巴组织均无荧光信号可检出.其中探针H2及其配套引物可特异性检测AHSV1、3、4、6、7、8、9七个血清型,而MGB探针及其配套引物可特异性检测AHSV 2、5两个血清型.分别以构建好的2型、9型全长VP7的pMD18-T-VP7质粒为标准品建立标准曲线,最终建立了AHSV TaqMan荧光探针实时荧光定量RT-PCR快速检测方法,可实现对全部9个血清型AHSV的定量检测和快速诊断.

关键词：非洲马瘟病毒、TaqMan探针、实时荧光定量RT-PCR

所属期刊栏目：43

分类号：S852.659.4(动物医学（兽医学）)

资助基金：公益性行业农业科研专项200903037;云南省应用基础研究项目2009ZC182M

在线出版日期：2013-12-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1167-1174