猪细环病毒2型ORF1基因的原核表达及其多克隆抗体的制备

摘要：

为制备猪细环病毒2型(TTSuV2)ORF1多克隆抗体,以TTSuV2阳性DNA为模板,经PCR扩增目的基因,并克隆于表达载体pET-32a(+),构建了ORF1基因的重组表达载体pET-TTSuV2-ORF1.重组质粒鉴定验证后,转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析结果显示重组蛋白分子质量约为45.3 ku,主要以可溶性蛋白的形式存在,Western-blot分析结果显示重组蛋白能够与TTSuV2阳性血清反应.表达的蛋白经HisTrapFF组氨酸标签融合蛋白纯化柱纯化后,免疫家兔,制备多克隆抗体,Western-blot分析结果显示制备的抗体具有高度的特异性,ELISA测定抗体效价为1∶1 600.证明,成功制备了特异的TTSuV2ORF1多克隆抗体.

关键词：猪细环病毒2型、ORF1、原核表达、多克隆抗体

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分类号：S852.659.2(动物医学（兽医学）)

资助基金：四川省科技支撑计划项目2011FZ0065,2012NZ0001

在线出版日期：2013-12-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1162-1166