流产布氏杆菌rfbD基因缺失株的构建及其生物学特性

摘要：

为了研究流产布氏杆菌rfbD基因缺失株的生物学特性和毒性变化,采用同源重组的方法构建该缺失株.以pDS132质粒为模板扩增sacB片段,通过NdeⅠ酶切位点,用T4连接酶将sacB片段与pUC19质粒连接,获得自杀质粒SacB-pUC19；用重组PCR方法扩增rfbD ORF内缺失668 bp的缺失突变核,通过PstⅠ、SmaⅠ酶切位点,用T4连接酶将△rfbD缺失突变核与自杀质粒SacB-pUC19连接,获得突变载体SacB-pUC19-△rfbD;将SacB-pUC19-△rfbD电转化至流产布氏杆菌S2308感受态细胞中,运用sacB反向筛选构建流产布氏杆菌S2308 rfbD无痕突变株,并分析其在巨噬细胞RAW264.7和BALB/c小鼠体内的存活能力.结果显示,成功构建了流产布氏杆菌S2308 rfbD基因缺失株,该突变株在巨噬细胞和小鼠体内毒力减弱,存活能力下降,证明rfbD基因是流产布氏杆菌的毒力相关基因.

关键词：布氏杆菌、rfbD基因、缺失株

所属期刊栏目：43

分类号：S852.614(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973项目2010CB530200;中央级科研院所公益性研究专项2013JB04

在线出版日期：2013-07-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：446-452