鸭疫里默氏杆菌荧光定量PCR检测方法的建立

摘要：

根据鸭疫里默氏杆菌(RA)16 S rRNA基因的保守序列设计特异性引物和TaqMan探针,建立了检测RA的实时荧光定量PCR方法.特异性试验结果显示,2株RA均呈阳性,而3株非RA均呈阴性.试验结果表明,该方法具有良好的特异性,该方法的表达式Ct=-3.676×1g copies+45.17,相关系数r2=0.996,R循环效率Eft(%)=93.482,DNA拷贝数在100～109范围内检测曲线有良好的线性关系,对质粒标准品的最低检测限为1.0×101copies/μL,重复性检测的变异系数低于5%,利用该方法分别对自然感染表现典型鸭疫里默氏杆菌病临床症状和病理变化的死亡雏鸭肝、心、脑组织等不同脏器进行细菌定量检测.阳性率均为100%,而用普通PCR检测阳性率分别只有72%(18/25)、84%(21/25)和92%(23/25).证实本研究所建立的荧光定量PCR方法具有敏感性高、特异性好、稳定性强的特点,可用于RA感染的快速诊断、流行病学调查以及鸭产品的检疫.

关键词：鸭疫里默氏杆菌、荧光定量聚合酶链反应、TaqMan探针

所属期刊栏目：41

分类号：S862.612(狩猎、野生动物驯养)

资助基金：广东省科技攻关计划2006A20301001

在线出版日期：2011-08-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：392-396