结核分枝杆菌csdA基因的原核表达及其免疫原性
以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增出1690 bp的csdA(cold-shock dead-box protein A)基因,经限制性酶切后,与pET28a载体连接,转化到大肠杆茵BL21中后,重组茵经0.2 mmol/L IPTG诱导表达了csdA蛋白及Ni-His-resin纯化蛋白,经Western-blot分析,鉴定了目的蛋白的反应原性.试验结果表明,重组质粒的双酶切鉴定和DNA测序均正确;SDS-PAGE和Western-blot分析结果显示,在64 ku处获得一目的条带,具有很好的免疫原性.证实,成功构建了重组表达质粒pET28a-csdA,获得了高纯度的重组蛋白,为深入研究csdA蛋白的功能奠定了基础.
结核分枝杆菌、csdA基因、原核表达
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S852.618;Q786(动物医学(兽医学))
国家重点基础研究发展计划(973计划);国家科技基础性工作专项
2011-03-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1232-1235