牛型布鲁氏菌A19株外膜蛋白OMP2b的表达及鉴定
根据GenBank中的牛型布鲁氏菌基因序列,设计了1对特异性引物,以A19菌株基因组DNA为模板,通过PCR扩增出外膜蛋白OMP2b的全长基因,将OMP2b经T-A克隆后进行了序列测定和分析.结果表明,OMP2b全长1128 bp,编码376个氨基酸.将OMP2b定向克隆至表达栽体pCold TF中,构建重组表达质粒pCold TF-OMP2b,转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下表达融合蛋白His-OMP2b.SDS-PAGE分析结果显示,His-OMP2b约为93 ku,与预期大小一致,表明His-OMP2b表达成功;经Western-blot分析,His-OMP2b能与牛型布鲁氏菌A19株全菌兔抗血清发生特异性反应,表明His-OMP2b具有免疫反应性.
牛型布鲁氏菌、外膜蛋白2b、蛋白表达、免疫印迹
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S852.614(动物医学(兽医学))
国家重点基础研究发展计划(973计划);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项
2010-11-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
925-928