牛型布鲁氏菌外膜蛋白OMP31基因的克隆与原核表达

摘要：

采用PCR技术从河北省某牛场流产污物中扩增得到布鲁氏菌外膜蛋白(OMP31)基因,将其连接入pMD18-T克隆质粒并进行序列测定;测序正确后,将该基因插入pET-28a(+)栽体中构建原核表达载体,转化大肠杆菌Rossetta(DE3)感受态细胞,诱导表达融合蛋白,并用Western-blot分析表达蛋白的免疫反应特性.结果显示,扩增了OMP31的全基因,基因全长723 bp,共编码241个氨基酸.成功构建了布鲁氏菌OMP31基因的原核表达载体pET-OMP31,并且在大肠杆菌中表达了OMP31蛋白,经Western-blot鉴定,该蛋白可以与布鲁氏菌免疫血清产生特异性结合反应.证实布鲁氏菌外膜蛋白OMP31基因已成功表达,为布鲁氏菌病血清学诊断方法的建立及亚单位疫苗的研究提供了基础资料.

关键词：布鲁氏菌、外膜蛋白OMP31、克隆、原核表达

所属期刊栏目：40

分类号：S852.614;Q786(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家”十一五”科技支撑计划项目2006BAD04A10-4;河北省重大技术创新专项计划项目07227146Z-4

在线出版日期：2010-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：842-845