结核分枝杆菌和牛分枝杆菌二重实时荧光PCR检测方法的建立

摘要：

根据结核分枝杆菌23 S rRNA基因序列和牛分枝杆菌特殊基因序列,设计了2对针对结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的特异性引物和2条用不同荧光基团标记的TaqMan探针,建立了结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的二重实时荧光定量PCR检测方法,并对建立的方法进行敏感性、特异性测定和临床样品检验.结果显示,该方法特异性好,能区分不同模板浓度组合的结核分枝杆菌和牛分枝杆菌;可检测到10 copies模板的结核分枝杆菌和牛分枝杆菌;对保存的50份PPD检测阳性牛的鼻黏液、牛乳和淋巴结进行检测,结果6份结核分枝杆菌阳性,1份牛分枝杆菌阳性,其余均为阴性,与PCR的检测结果一致.由此可见,建立的二重实时荧光定量PCR方法具有特异、敏感、快速、可定量检测等优点,适合用于结核分枝杆菌和牛分枝杆菌的鉴别检测.

关键词：结核分枝杆菌、牛分枝杆菌、二重荧光定量PCR

所属期刊栏目：40

分类号：S852.618;Q503(动物医学（兽医学）)

资助基金：公益性行业科研专项;广西壮族自治区项目;广西壮族自治区项目

在线出版日期：2010-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：827-834