重组狮头鹅α干扰素的制备及其抗病毒活性

摘要：

用PCR方法扩增了狮头鹅α干扰素(IFN-α)成熟肽编码序列,并克隆至pET-32a(+)表达载体,将重组质粒转入E.coli BL21(DE3)感受态细胞并用IPTG诱导表达.SDS-PAGE、Western-blot检测结果表明,重组狮头鹅IFN-α融合蛋白(rGoIFN-α)的分子质量大小约36 ku,能与IFN-α抗血清发生特异性结合反应.rGoIFN-α包涵体经过变性、超滤纯化和复性,得到可溶性rGOIFN-α.rGoIFN-α经肠激酶酶切(eGoIFN-α)、亲和纯化获得狮头鹅α干扰素蛋白(GoIFN-α).rGoIFN-α经Western-blot检测证实是GoIFN-α蛋白.采用微量细胞病变抑制法分析α干扰素的抗病毒活性,复性后纯化的rGoIFN-α的抗病毒活性达 1.42×104U/mg;eGoIFN-α的抗病毒活性达8.23×104U/mg,GoIFN-α抗病毒活性达3.34×105U/mg.结果表明,rGoIFN-α能够抑制新城疫病毒Roakin株在鸡胚成纤维细胞中复制.

关键词：狮头鹅、α干扰素、新城疫病毒、抗病毒活性

所属期刊栏目：40

分类号：S852.42(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2010-09-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：733-737