10.3969/j.issn.1673-4696.2008.10.005
胸膜肺炎放线杆菌体内表达基因的筛选
利用体内诱导抗原技术对胸膜肺炎放线杆菌(APP)体内表达的基因进行了初步筛选.将收集到的5份感染了APP1型的猪血清混合,分别用体外培养的APP1和大肠杆菌BL21(DE3)的全菌及全菌裂解物进行吸附,用ELISA方法检测吸附效果,经吸附后血清D450nm分别由原来的0.927和0.239降低为0.196和0.078.同时,将APP1基因组DNA以Bsp143 Ⅰ进行酶切,回收500~2000 bp的片段,与pET30a/b/c载体连接,构建了APP1基因组质粒表达文库,库容量(CFU)为2.0×105.用吸附后的血清通过菌落原位免疫杂交筛选该基因组表达文库,从3 000个菌落中获得了12个阳性克隆.
胸膜肺炎放线杆菌、体内诱导抗原技术、菌落原位免疫杂交
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S852.619(动物医学(兽医学))
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所中央级公益性科研院所基本科研业务专项资金项目2008-14
2009-01-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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